尿道内口约平耻骨联合后面中央或上部，女性低于男性。其走行向前下方，穿过尿生殖膈，开口于阴道前庭的尿道外口。

尿道内口周围平滑肌组成的膀胱括约肌所环绕。穿过尿生殖膈处则被由横纹肌形成的尿道阴道括约肌所环绕。尿道外口位于阴道口的前方、阴蒂的后方2-2.5cm处，为尿道阴道括约肌所环绕。在尿道下端有尿道旁腺，其导管开口于尿道周围。尿道旁腺发生感染时可形成囊肿，并可压迫尿道，导致尿路不畅。