血清碱性磷酸酶

更新时间:2023-02-08 19:23

碱性磷酸酶(ALP)属磷酸单酯水解酶,是一组特异的磷酸酯酶。该酶广泛分布于人体组织和体液,以骨、肝、乳腺、小肠、肾中含量较高,其大部分由骨细胞产生,小部分来自肝,经胆汁排入肠道。ALP测定方法主要是比色法连续监测法

辨别原理

(1)比色法:ALP在碱性条件下使磷酸苯二钠水解,生成磷酸和游离酚,后者与4-氨基安替比林作用,并经铁氰化钾氧化成红色醌类化合物,其颜色的深浅与ALP活性成正比。

(2)连续监测法:ALP在碱性条件下,使磷酸对硝基苯酚(4-NPP)释放出磷酸基团,AMP参与磷酸酰基的转移,促进酶反应速率,生成游离的对硝基苯酚(4-NP),并形成黄色的醌,其吸光度的增高速率与酶活力成正比。

试剂

比色法

①0.1mol/L碳酸盐缓冲液(pH10.0):称取无水碳酸钠6.36g,碳酸氢钠3.36g,4-氨基安替比林1.5g,溶于800ml蒸馏水中,移入1000ml容量瓶内,加蒸馏水至刻度,置棕色瓶内保存。

②20mmol/L磷酸苯二钠溶液:称取磷酸苯二钠(AR)2.18g,迅速加入已煮沸的500ml蒸馏水中,冷却后加入氯仿2ml防腐,冰箱保存。此为基质液。

③铁氰化钾溶液:称取铁氰化钾2.5g,硼酸17g,分别溶于400ml蒸馏水中,混合后加水至1000ml,置棕色瓶内避光保存。出现蓝绿色应弃去。

④酚标准贮存液(1mg/ml):称取重蒸馏酚1.0g,溶于0.1mol/L盐酸中,并加至1000ml刻度。也可购买标准液。

⑤酚标准应用液(0.05mg/ml):取酚标准贮存液5ml,加蒸馏水至100ml。

连续监测法

①1.8mol/L AMP缓冲液(pH10.3):称取2-氨基-2甲基-1-丙醇(AMP,MW89.14)160g,加1mol/L盐酸320ml混合,加500ml新煮沸已凉的蒸馏水,调pH至10.3±0.02(30℃),并加上述蒸馏水至1000ml,置紧塞瓶中于冰箱保存。

②10.5mmol/L氯化镁溶液:称取氯化镁(MgCl2·6H2OMW20 3.31)0.21g,溶于水中,并稀释至100ml,室温保存。

③31.5mmol/L磷酸对硝基苯酚溶液(4-NPP):称磷酸对硝基苯酚二钠盐(含6分子水,MW 371.15)120.8mg,溶于100ml蒸馏水中,置棕色瓶内于冰箱保存。

④底物缓冲液(0.84mol/L AMP,15mmol/L 4-NPP,0.5mmol/L MgCl2,pH10.3)将AMP、4-NPP和MgCl23种溶液按10∶10∶1混合,37℃预温待用。

正常值

(1)酶速率法(37℃):

成人:40~160U/L;

儿童:<350U/L;

(2)磷酸苯二钠法:

成人:3~13Kat单位;

儿童:5~30kat单位;

(3)动态法:成人:20~110U/L;

青少年:

1.男性:<750U/L;

2.女性:<500U/L;

儿童:<500U/L;

婴儿:50~240U/L。

(注:具体参考值请根据各实验室而定。)

临床意义

(1)升高:

①无黄疸肝硬化、肝细胞癌、胆管疾病(胆管癌,肝内结石)、局限性肝损害(转移性肝癌肝脓疡肉芽肿肝损伤)、其他肝疾病(慢性肝炎脂肪肝)、骨疾病(佝偻病骨软化症、或骨肉瘤)、转移性骨癌甲状腺功能亢进症甲状旁腺功能亢进症慢性肾功能不全恶性肿瘤(骨、肝转移)等。

②有黄疸:病毒性肝炎、酒精性肝炎药物性肝损害肝炎病毒以外的病毒引起的肝损害、原发性胆汁性肝硬化、其他肝内胆汁瘀滞、阻塞性黄疸(胆管癌胆管细胞癌胰头癌,总胆管结石硬化性胆管炎)。

(2)降低:牛奶-碱综合征、坏血病甲状腺功能减退症、维生素D摄入过多、恶性贫血、重症慢性肾炎呆小病恶病质等。

偏高原因

代谢异常原因

碱性磷酸酶主要用于阻塞性黄疸、肝癌胆汁淤积性肝炎等的检查,阻塞性黄疸、原发性肝癌继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎都会使碱性磷酸酶偏高。

胆道排泄异常

碱性磷酸酶是需要经过肝脏,然后由胆汁排出,当排泄过程中出现异常,那就会引起碱性磷酸酶偏高。

骨骼组织原因

由于骨组织中此酶亦很活跃。因此,孕妇、骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松等血清碱性磷酸酶会升高。

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